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生物传感器原理工艺验证微量元素定量测定

诺亚琼斯^*

*通信:

诺亚琼斯
编辑部,
Physcal Chemstry:一个印度日报》
英国,
电子邮件: (电子邮件保护)

引用:琼斯n生物传感器原理工艺验证微量元素定量测定。Int J化学Sci 2022; 17 (1): 162

文摘

生物分析方法用于定量评估药物的数量,生物转化产品,或其他指定化学物质在生物矩阵,和经常用来协助监管提交为药代动力学和生物等效性研究提供重要的数据。生物分析方法受到彻底的方法验证过程保证他们可以生成可靠的、可再生的数据达到或超过了当前的监管指导。监管的建议并不总是占微妙的微量元素的发现。从作者的角度来看,本研究的目的是提供指导在微量元素分析方法验证两个常见的和强大的实验技术:电感耦合plasma-optical排放光谱法和电感耦合plasma-MS。

介绍

药物、生物转化产品和其他指定的物质在生物矩阵量化如血液、组织、血清、尿液和血浆使用分析过程。支持监管意见书,这些方法经常给营养至关重要的数据,安全、药代动力学/药效学或生物等效性调查。因此,它是至关重要的,确保分析的方法可以产生准确的,可重复的结果。目标,生物分析方法验证过程显然是为了建立分析方法适用于其用途,包括再现性的关键概念和可移植性[1]。在这项研究中,方法验证是指建立生物分析技术的演示和确认后的目的适用性方法开发完成。提供可靠的、可重复的结果,以满足或超过性能需求表明在适当的监管指导的基本参数精度,精度、再现性、选择性、灵敏度、稳定、健壮的方法验证[2]是必要的。

大分子药物的重要性上升,以及有机小分子药物的频率,获得了行业委员会和监管机构的注意,这些物种的生物分析方法验证。色谱的方法通常是连接到一个质谱检测器为小分子(如质/ MS)测量,而non-chromatographic配体结合化验用于大分子研究(lba)。因此,属性有关的大小、结构和检测方式的微小和大分子分子都包含在这些生物分析技术的最佳实践验证物种[3]。另一方面,目前最小的资料分析方法验证微量元素的决心。此外,分析支持行业的有限的信息通常并不是标准化的。

许多生物系统和治疗物质含有微量元素,和小浓度的变化在一个生物体可以在营养有很大的影响,疾病成因、预防和治疗。因此,他们精确的、可重复的检测在生物矩阵通常是成功的至关重要的药理、生物利用度、毒理学和流行病学研究。尽管验证过程为微量元素类似于小分子有机物质,有些微量元素测试结果验证的关键差异由于其物理化学特性。因为微量元素在自然界是如此普遍,它是至关重要的贡献密切关注分析试剂和分析过程。微量元素一般内在生物矩阵,和正常水平在一个矩阵可能显著不同样本之间的食物,其他环境暴露,[4]和生活方式的选择。结果,即使对于non-endogenous组件,建立适当的均化和消化一个合适的控制矩阵是至关重要的。

讨论

是审慎的分析实验室彻底测试提出的分析方法通过一个严格的方法开发过程之前启动正式的验证。方法开发活动通常包括微量元素决定明智的选择和评价与分析和相关仪器参数,以及评估分析的选择性、线性度,灵敏度(定量分析),恢复控制矩阵和可能存在的干扰物种,潜在的结转,样本同质性/代表性[5]。建议样品制备和分析过程,从理论上讲,允许一致的分析识别在生物相关水平,考虑到可能出现的任何潜在的障碍在分析样品分析(例如,内源性分析浓度或偶尔的唇位的样品)。如果验证方法是被转移,选择应该考虑在开发可运输样品制备和分析的参数。

这取决于应用程序,物种形成测试可能需要在分析实验室,确保分析可以恢复从控制矩阵当它存在于一个特定的化学形式或氧化态[6]。物种形成的实验通常进行用连字符连接的方法,如离子色谱法(IC) -ICP-MS或isotopically丰富,特有的形式的分析。即使分析样本分析的最终目标是确定整个微量元素的浓度,这些测试通常可以产生有用的信息和援助过程的发展。系统误差和随机误差的水平(分别为平均偏差和方差)与重复控制样品的决定可能被视为过程有效性的一个重要指标,因为他们识别方法准确度和精密度的程度(标准和质量控制样品)。全面验证,至少五个复制的质量控制(QC)样本各个级别评估相对鲁棒性在至少两天由两个不同的分析师在三个不同的准确度和精密度。在实践中,越来越多的设施评估六个复制在每一个质量控制水平,但5或6、是否雇佣相同数量的关键当证明新的质量控制水平或准备,包括稀释QC [7]。此外,LLOQ的资格验证校准范围和限制,ULOQ样本包含在准确度和精密度测试。在运行三个准确度和精密度,LLOQ-QCs评估在实践中三次。

之前样品提取或分析,微量元素分析通常指的是一个额外的元素引入一个常数样品,校准标准和质量控制空白和样品。通过显示的比例分析信号的信号作为分析浓度的函数,是反应纳入校准过程。应该是电离或雾化行为相似分析,允许连续信号校正和监控每个样本的提取或消化效率,标准,质量控制在正常操作工具。当利用的是正确分析典型ICP-OES测量过程中信号的变化,有必要考虑是否元素是溶解度兼容(acid)矩阵和是否有任何光谱干扰的发射波长。还必须含污染物,不出席适度,内生水平样本矩阵,和添加浓度足以产生一个可接受的信噪比。是元素应该有相同的ICP强度变化模式分析(相同的发射或电离)[8]。

作为一个分析质量控制措施,继续校准验证(闭路)控制是常用元素分析实验室。当ICP-OES或ICP仪器软件约束阻止使用托架校准曲线,这些控件常常用来调查潜在的变化分析和仪器响应由于某些ICP仪器。闭路控制通常是中层校准标准,经常没有一个矩阵,是定期检查,确保校准斜率是不会受到潜在的仪器响应波动在一个调查[9]。如果采用闭路检查,通过/失败标准基于仪器响应(或浓度)决定提前了。此外,这些需求进行验证,成为验证方法的验收标准的一部分。闭路用于调节支架样品在实践中闭路控制支架样品,如果一个闭路控制失败,将样品被拒绝。可选闭路控制只在某种程度上,准备和他们不取代强制性的使用矩阵QC样品在低,中,高水平。

物理性质,矩阵,生物标志物本身,和样品容器系统都会影响生物标志物稳定在一个生物矩阵。虽然总浓度的微量元素在生物矩阵通常是稳定的,截然不同的化学形式或物种元素的可能大大不同的稳定性资料[10]。例如,不同形式的相同的元素在生物矩阵,或在一个矩阵提取样品制备后,可以大大不同的波动,降水,container-wall吸附特性。结果,评估稳定,建议的可能形式(或形式)微量元素被考虑。在方法验证、几种类型的稳定性评估。稳定性测试应该可行的程度,复制存储条件,预计发生在样本收集、存储和分析样品制备样品。所需的微量元素稳定性测试详细低于[11]。

标准参考资料从一个认证机构,如NIST,或股票解决方案直接源自于元素分析的参考资料是很常见的。尽管认证机构或商业股票这些解决方案的解决方案提供者可能执行适当的描述,它仍然是重要的验证量化的参考标准股票解决方案使用记录方法(通常描述在一个SOP)。可以选择直接使用这些标准获得到期前可以降低证明的必要性股票溶液稳定性[12]。在方法验证,关键文档的情况下引用,以及相关联的股票试剂,保持稳定,以满足试验的基本要求。模仿产生样本的储存条件,包括货物存储条件下,长期储存稳定性测试应该执行。QC样品至少创建两个标称浓度(最好是,低收入和high-QC水平)和测试一式三份针对刚做好的标准曲线来评估长期稳定。在-20°C存储通常是足够的对于总微量元素测试,尽管-70°C存储可能更适合有机金属化合物或微量元素的测定物种[13]。值得注意的是,美国食品和药物管理局建议维持在-70°C样品被测试稳定在-20°C。

至少有三个QC样品复制应该生成的至少两个层次(最好是低收入和high-QC浓度)和受到至少3个冻融循环测试冻融稳定性。冻融QC样品冷冻至少24小时的名义在解冻之前储存温度。样品必须允许在室温下解冻完全没有援助refrozen之前至少12小时周期。对于短期和台式稳定测试,生成QC样品一式三份至少两个名义浓度(例如,lowand high-QC水平)。质量控制样品在室温下保持足够长的时间涵盖所有样品处理活动[14]。

结论

许多生物系统和治疗需要的微量元素,但目前最小的证据的验证方法确定它们在生物矩阵。因为结果,在生物分析方法验证技术支持业务并不像实验室的一般标准,寻求占困难特定微量元素用不同的方法测量。虽然微量元素的方法验证方法和小分子有机化合物本质上是相同的,有一些关键的差异分析方法验证微量元素源于他们的理化性质和最常见的检测方法,如ICP-OES和icp。因为很多微量元素很常见,需要特别注意调节分析化学的和分析过程的贡献是经常提倡。内源性微量元素在生物是常见的矩阵,和正常水平在一个矩阵可能样品之间差异显著。因此,关键是要注意建立和均质化一个合适的控制矩阵。