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植物化学的筛查、总酚类黄酮含量、总抗氧化能力和抗真菌活性Cymbopogon竹提取物布基纳法索

*通信:
Dabire厘米应用有机化学和物理实验室(L.C.O.P.A.) Ouaga大学我公关。约瑟夫•KI-ZERBO这里输入/海03 BP 7021瓦加杜古03,布基纳法索、电话:25 30 + 226 70 64;电子邮件:dabireconst@yahoo.fr

收到日期:2017年9月21日接受日期:2017年11月30日发表日期:2017年12月04日

引用:Bationo RK, Dabire厘米,丙烯酸- A, et al。植物化学的筛查,酚醛树脂,类黄酮内容、总抗氧化能力和抗真菌活性Cymbopogon竹提取物布基纳法索。Nat Prod印第安纳j . 2017; 13 (2): 114

文摘

提取获得根,茎,叶和花Cymbopogon竹使用正己烷、二氯甲烷(DCM),乙酸乙酯和甲醇筛选的植物化学物质,总酚含量,(TPC)类黄酮内容(交通)、总抗氧化成分(TAC)和抗真菌活性。类黄酮、酚酸和单宁生物碱主要是提取,根据所用的溶剂提取。

TAC是评估使用铁降低抗氧化能力(收紧)和DPPH自由基清除化验。收紧的结果分析表明,methanolic花提取物TAC最高(112.94±2.4μg TE /毫克的提取物),其次是叶(68.56±7.53μg TE /毫克的提取),根(45.17±4.28μg TE /毫克的提取物)和茎(39.21±2.34μg TE /毫克的提取)。最高的TPC methanolic花提取物中发现了(171.17±1.42 GAE /毫克的提取)而DCM和根乙酸乙酯提取物表现出最好的交通分别为348.34±12.48,323.86±31.55μg QE /毫克的提取。

只有methanolic提取物c以上不同部分在其10毫克/毫升四当地的真菌。结果表明,methanolic 16.16%的根提取物有抑制作用,对径向增长分别为19.15%和10.79%镰刀菌素moniliforme, Phoma sorghina和曲霉菌flavius曾经。Methanolic只花提取物抑制镰刀菌素moniliforme径向增长19.4171%和曲霉菌flavius曾经在7.11%。没有植物提取物显示部分的抑制作用Bypolaris orezae。

关键字

Cymbopogon竹;酚醛树脂;类黄酮;Antioxydant;抗真菌

介绍

真菌是负责农业损失,而作物生长和当他们后存储。在存储期间,真菌可以使粮食作物不适合消费,通过改变种子的营养价值或产生真菌毒素,对人类和动物有害健康(1]。许多真菌是已知过敏或者有毒的间接原因障碍消费者因为真菌毒素的生产或过敏原。

Phoma sorghina,镰刀菌素moniliforme,Aspergilus flavus,Bypolaris oryzae是常见的真菌引起的改变在开发阶段包括收获后当地的一些植物,如高粱、玉米、小米、大米。通常这些phytopatogenic真菌是由合成杀菌剂控制;然而这些杀菌剂的使用越来越限制由于农药对人体的危害健康和环境(2]。主要毒性作用有致癌性,基因毒性、肝毒性、生殖障碍免疫抑制(3,4]。相当一部分的世界人口生活在贫困线以下,发展中国家正在遭受健康与消费相关的问题霉菌毒素污染谷物或谷物5]。尽管有效且高效的控制种子的种子传播真菌可以通过合成化学杀菌剂的使用相同的不能用于谷物毒性的原因2]。因此,有必要寻找替代方法来储存谷物/谷物供人类食用,没有毒性问题。

植物提取精华已报告表现出抗菌、抗真菌和杀虫特性(6,7]。此外,许多植物已知包含许多次生代谢产物酚类、类黄酮,奎宁,精油、生物碱、皂苷和类固醇。以前的工作表明,有一个重要的酚类化合物之间的联系,主要是类黄酮和大部分的生物活性如抗氧化、抗炎和抗真菌的活动8,9]。另一方面,一些工作在实验室试验证明植物部分,如根、叶、种子、茎和花具有抑制属性对细菌,真菌和昆虫(10]。目前的工作旨在研究抗真菌的生物活性提取物的不同部分Cymbopogon竹从布基纳法索。这种植物被选中报告数据显示在其生物活性(11]。Cymbopogon竹用于当地非洲吗医学治疗风湿等疾病,发烧,咳嗽,皮肤障碍(叶子和花汤)和动脉高血压(12]。此外,以前只能专注于精油的挥发性化合物Cymbopogon竹(11从布基纳法索],但没有研究一直在进行非易失性化合物在我们的知识。因为可能的酚类化合物和生物活动之间的联系,从根中提取获得,叶子,茎和花的植物第一次筛选的植物化学物质,酚醛树脂,类黄酮和总抗氧化物含量;随后,最有效的提取的抗真菌活性进行了测试。

材料和方法

材料

植物材料:植物的根、茎、叶和花Cympobogon竹收集在2015年,在一个实验场,在应用科学和技术研究所、天然产品部门(布基纳法索瓦加杜古)。所描述的植物已被确认和实验室的植物生物学生态大学的瓦加杜古,标本被提起。所有的样品都干15天。干燥后,植物材料被压碎。

生物材料:四种真菌(Phoma sorghina,镰刀菌素moniliforme,Bipolaris oryzae黄曲霉)是由谷物或离开的高粱、玉米、小米和大米收集在布基纳法索。一旦确认了出没的谷物,每个真菌被使用一根针和放置在皮氏培养皿中培养基(麦芽汁琼脂)。培养皿培养在25°C,紫外灯照射,至少5天。真菌是识别和孤立的纳粹Boni大学植物病理学实验室的波波。

方法

植物提取物的制备:50 g的每个植物部分先后提取(三次),300毫升的正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯和甲醇磁力搅拌下冷浸渍24 h。过滤解决方案,集中在降低的压力下屈服己烷提取物(他)、二氯甲烷提取电路倍增设备(),乙酸乙酯提取物(运算单元)和甲醇提取物(我)。因此,十六个提取准备。

植物化学的screning:所有准备的提取筛选几个化学组:单宁酸、生物碱、黄酮、皂苷、anthracenosids、酚酸,使用方法所描述的瓦格纳et al。13]

总酚醛树脂含量测定(TPC):总酚醛树脂含量是由Folin-Ciocalteu方法所描述的罗德里et al。14]。没食子酸作为标准。建立校准曲线第一次使用没食子酸溶液的浓度范围从0 25μg / mL, 50μg /毫升,75μg /毫升和100μg /毫升。然后60μL Folin-ciocalteu试剂(FC-R 1:10稀释),是没食子酸的添加到解决方案。混合物是离开站在室温下8分钟,然后120μL碳酸钠溶液(Na2有限公司3),7.5%被添加到中和剩余试剂。吸光度是记录在700 nm孵化后30分钟37°C。之后,60μL每个提取物溶解在DMSO,适当稀释,添加到60μL FC-R,而不是没食子酸。总酚醛物质内容,决定从校准曲线的方程,表示为μg没食子酸当量/ mg提取(μg GAE /毫克)。

类黄酮内容(交通)测量:类黄酮内容是用氯化铝比色测定所描述的Zhishen J et al。15用细微的修改(适合微型板块)。建立了校准曲线使用不同浓度(0,25μg / L, 50μg / L, 75μg / L和100μg / L)的槲皮素的解决方案。简单地说,25μL植物提取物(适当稀释)或槲皮素在不同浓度的标准溶液加入150μL蒸馏水。然后10μL 5% NaNO2补充道。5分钟后,10μL AlCl的10%3是补充道。6分钟后,50μL氢氧化钠添加了1米。孵化后30分钟在37°C,混合物的吸光度被记录在415海里。测试进行了一式三份和结果表示为μg槲皮素当量/毫克的提取(μg QE /毫克)。

总抗氧化成分的评价(TAC):TAC的提取测定使用两个(02)方法:2,2-diphenyl-1-picryhydrazyl DPPH自由基清除实验和铁降低抗氧化能力(捆牢)。Trolox被用作参考。所有的测试进行了使用微型板块读者(分光光度计MP96,塞法),进行了一式三份。

DPPH自由基清除测试:这个测试进行描述的方法显示Lamien-Meda et al。16用细微的修改和适应微型板块。校准曲线的Trolox首次建立了使用标准的解决方案不同浓度(10μg /毫升50μg /毫升)。为此,简单地说,200年10μL DPPH的解决方案4米被添加到50μL Trolox解决方案。混合物被允许站10分钟在黑暗中在室温下,吸光度被记录在517海里。

之后,50μL每个提取适当的稀释与200μL DPPH混合解决方案。吸光度是记录在517 nm, 10分钟后开始的反应。总抗氧化能力测定校准曲线和方程的结果表示为μg Trolox等价物/ mg提取(μg TE /毫克)。

铁降低抗氧化能力(收紧)分析:在这种方法中,2,4,6-Tripyridyl-s-Triazine (TPTZ)用作氧化剂基础(17]。收紧试剂是由混合1毫升TPTZ(10毫米),10毫升的醋酸钠缓冲(pH = 3.6)和1毫升的解决铁(III)氯化,20毫米。在DPPH清除试验,建立了校准曲线使用Trolox解决方案在不同浓度(10μg /毫升50μg /毫升)。然后,200μL收紧试剂添加到50 TroloxμL之前的每个解决方案,其次是30μL蒸馏水。强烈的蓝色混合物的吸光度是读10分钟后595海里。

每个样本的提取,50μL代替Trolox适当稀释使用。总抗氧化能力测定校准曲线和方程的结果表示为μg Trolox等价物/ mg提取(μg TE /毫克)。

抗真菌活性的提取:这个测试是使用棒子et al(描述的方法执行1]。真菌和增长他们的隔离:真菌进行测试是生长在培养皿中包含的一个新的麦芽汁琼脂培养基9厘米直径。从10几天大的殖民地四菌丝体外植体相同的大小(5毫米)被放置在皮氏培养皿中培养基的中心有或没有提取进行测试。所有的精华都溶解在1% DMSO和测试10毫克/毫升。意大利足协C作为积极控制和测试在1毫克/毫升。接种板在高温下孵化室在28°C和在黑暗中保持了10天(棒子et al ., 2012)。

评价抗真菌的活动:径向增长的评价涉及到跟踪培养皿的盖子两个垂直的直线通过外植体的中心。菌丝体殖民地(cm)的直径测量每两(2)天孵化后10天。测试进行了一式三份。每个样品的抑制百分比计算使用以下公式:

方程

在那里,Rb:空白(没有提取)的半径;

Rext:提取的半径。

结果与讨论

植物化学的筛选

研究的结果发表在表1;化学组的存在与否取决于植物组织和使用的溶剂提取。

提取 丹宁酸 类黄酮 生物碱 Anthracenosides 皂苷 酚酸
己烷 - - - - - - + + - - - - - - - - - - - - +
扩张型心肌病 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
乙。Ac。 - - - - - - + + + - - - - - - +
甲醇 + + + + - - - - - - +
己烷 - - - - - - + + - - - - - - - - - - - - +
叶子 扩张型心肌病 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - + - - - - - -
乙。Ac。 - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -
甲醇 + + - - - - - - + + +
己烷 - - - - - - - - - - - - + - - - - - - - - - - - - - - - - - -
扩张型心肌病 - - - - - - - - - - - - + - - - - - - + - - - - - -
乙。Ac。 - - - - - - + - - - - - - + - - - - - - - - - - - -
甲醇 + + - - - - - - + - - - - - - +
己烷 - - - - - - - - - - - - + - - - - - - - - - - - - - - - - - -
扩张型心肌病 - - - - - - - - - - - - + + + - - - - - -
乙。Ac。 - - - - - - - - - - - - - - - - - - + - - - - - - - - - - - -
甲醇 + + - - - - - - + + +

表1。化学组在不同的组织c .竹提取物。

提取 总酚含量(µg GAE /毫克的提取)
叶子
扩张型心肌病 34.44±1.21 32.63±0.33 14.94±0.32 17.52±0.34
乙。Ac。 50.17±0.60 44.57±0.24 20.95±1.56 30.17±0.52
甲醇 171.17±1.42 132.95±2.20 98.55±2.14 51.93±0.17

表2。总酚含量的不同部分c .竹提取物。

花提取物,无论使用的溶剂,不含皂甙。单宁和anthracenosides而出现在甲醇提取。然而,类黄酮,生物碱和酚酸都出现在正己烷、乙酸乙酯和甲醇提取物。因此,除了sponins,c .竹花提取包含大部分的化学组筛选。

叶乙酸乙酯提取物的结果并没有显示任何化学组的存在虽然大多数的化学集团甲醇提取物中发现了。只在DCM提取皂苷被发现。甲醇是最合适的溶剂来获取这些化学物质c .竹叶子。

甲醇茎提取物富含单宁、黄酮、anthracenosides和酚酸但没有包含生物碱和皂甙。没有能找到化工集团己烷和DCM茎提取物,除了生物碱和皂甙。

Anthracenosides,生物碱和皂甙是高度出现在根提取物。丹宁酸和类黄酮可以发现,只有在甲醇根提取物。c .竹根提取物不包含酚酸。

很多化学物质可能会发现的c .竹不同部位,这取决于类型的溶剂用于提取。这种植物可能确实对许多疾病有广泛的使用。

TPC的不同部分c .竹变化从14.94μg GAE /毫克干提取DCM茎中提取171.17μg GAE /毫克甲醇鲜花提取的提取干。花朵拥有最高TPC相比不同的部分。总酚醛树脂含量花34.44μg GAE /毫克,50.17μg GAE / mg和171.17μg GAE /毫克的DCM分别提取,乙酸乙酯和甲醇提取物。另一方面,甲醇提取物有TPC最高(51.93 - 171.17μg GAE /毫克的提取),随后乙酸乙酯提取物(20.95μg GAE /毫克50.17μg GAE /毫克的提取)和DCM提取(14.94到34.44),因为它显然所示图1。甲醇,乙醇,适用于溶剂提取酚类化合物但甲醇提取其他化合物并不酚醛树脂。这些结果与植物化学的研究结果表明,甲醇提取物含有许多化学组。

natural-products-phenolic-content

图1:总酚含量的不同部分c .竹提取物。

这些TPC大多高于报道Lippia mulflora叶子提取物根据我们之前年代的作品(9]。此外,甲醇提取的c .竹花和叶子含有更高的TPC比Kouassi et al(报道的18c . citratusGAE甲醇树叶提取物象牙海岸(118.14毫克/ g(提取)。DCM提取显示最低的TPC但这些值高于TPC报道Karanga et al。19不同提取的大戟属植物hirta从布基纳法索。

c .竹不同部位提取物,不管使用的溶剂,包含强大的酚醛内容,因此这种植物可以作为天然酚类化合物的来源。

类黄酮内容(交通)

类黄酮内容(交通),表示为μg槲皮素当量/毫克的提取、聚集表3。结果表明:

提取 类黄酮内容(µg QE) /毫克的提取)
叶子
扩张型心肌病 93.91±2.83 147.55±23.24 207.20±4.60 348.34±12.48
乙。交流 132.49±4.701 270.41±32.20 189.38±11.62 323.86±31.55
甲醇 250.12±14.94 134.23±4.051 58.31±8.01 159.02±28.41

表3。类黄酮的不同部分的内容c .竹提取物。

1。利用DCM抽提溶剂,根交通最高,其次是茎、叶和花。交通价值在这些不同的植物部分分别为348.34;207.2、147.55和93.91μg QE /毫克的提取;

2。在乙酸乙酯提取物、根提出交通最高(323.86μg QE /毫克的提取)相比,叶片(270.4μg QE /毫克的提取);

3所示。在甲醇提取物,最高的交通被发现花(250.12μg QE /毫克的提取)和最低的在茎提取物。

结果还显示,用于提取酚醛树脂和溶剂的类型类黄酮扮演重要的角色。的确,酚类化合物很容易提取,而乙酸乙酯和甲醇有时,DCM是适当的提取类黄酮(图2)。虽然c .竹花富含酚类化合物,其根源仍交通最高的植物部分,无论使用的溶剂萃取(表3)。

natural-products-flavonoids

图2:类黄酮在不同的部分内容c .竹提取和使用不同的提取溶剂。

总抗氧化成分(TAC) c . gyganteus提取物的不同部分

TAC测量使用两种不同的方法:DPPH自由基清除测试和铁降低抗氧化能力(收紧)测定。研究的结果发表在表4。我们注意到,c .竹不同地区拥有重要的TAC。利用DPPH测试中,最高的TAC能找到鲜花(12.52μg TE /毫克到100.40μg TE /毫克的提取),然后在叶子(17.63μg TE /毫克到57.15μg TE /毫克的提取)和茎(16.74μg TE /毫克到39.21μg TE /毫克的提取)最后,在根(9.33μg TE /毫克到38.68μg TE /毫克的提取)。结果还表明,对于每一个植物部分,甲醇提取物乙酸乙酯相比表现出最高的TAC和DCM提取物。花提取物为例,100μg TE /毫克甲醇提取,提取被发现的约三倍TAC在DCM提取物乙酸乙酯提取和十次。收紧方法获得的结果类似与DPPH测试发现,即使有时,收紧化验似乎高估了TAC提取物。

总抗氧化成分(µg TE /毫克的提取)
提取 DPPH 收紧
扩张型心肌病 12.52±0.3 14.89±1.47
乙。交流 37.96±4.02 38.2±3.2
甲醇 100.40±8.41 112.94±2.34
叶子 扩张型心肌病 20.14±0.05 20.30±1.50
乙。交流 17.63±1.67 19.67±4.08
甲醇 57.15±6.47 68.56±7.53
扩张型心肌病 16.74±0.00 18.16±2.38
乙。交流 27.47±2.55 36.73±0.91
甲醇 39.21±2.34 31.46±6.52
扩张型心肌病 9.33±1.79 7.60±8.45
乙。交流 16.17±3.27 13.77±2.44
甲醇 38.68±2.63 45.17±4.28

表4。总抗氧化成分(TAC) c在竹提取物不同部分。

众所周知,提取物具有很强的TPC和薄膜电路一般存在更高的TAC (20.]。在这个工作中,methanolic提取物的花、叶、茎和根c .竹被发现持有,在大多数情况下,TPC最高,交通和TAC。所以这种植物的不同部分的甲醇提取物进行抗真菌的活动。

抗真菌活性

每个甲醇提取物的抑制百分比、测试四种真菌在10毫克/毫升,计算每两天到十天;结果是聚集在表5

%的甲醇提取物的抑制
工厂部分 持续时间 镰刀菌素moniliforme Phoma sorghina Aspergilus Flavus Bypolaris orezae
2nd一天 22.31±5.36 -2.39±15.55 10.56±6.9 -34.49±11.72摄氏度
4th一天 16.23±4.17 -9.13±13.95 8.33±8.3 -85.18±11.95 b
6th一天 13.66±12.80 -26.47±18.6 2.36±0.01 -114.05±15.6 b
8th一天 25.87±5.60 -3.47±0.6 1.27±0.54 -168.35±21.04
10th一天 19.00±6.39 ND 13.04±2.4 -182.4±16.75
叶子 2nd一天 18.160±4.77 b -11.81±15.77 ND ND
4th一天 3.865±4.64 ab -38.27±21.4 ND ND
6th一天 1.610±6.70 ab -55.43±18.8 ND ND
8th一天 2.197±6.29 ab -25.00±0 ND ND
10th一天 -1.839±3.18 ND ND ND
2nd一天 9.857±6.72 -3.99±2.55 -9.86±6.3 -55.8±9.0摄氏度
4th一天 1.018±11.24 -23.72±3.22 -1.81±0.8 -122.5±19.01公元前
6th一天 4.659±4.20 -33.61±1.18 -3.53±5.18 -144.0±35.03 ab
8th一天 5.814±5.89 -12.96±9.4 -6.98±1.4 -202.7±35.76
10th一天 10.321±5.58 ND 2.56±5.7 -186.1±25.7 ab
2nd一天 20.16±4.49 21.11±4.32 8.9±2.76 -45.00±18.02 b
4th一天 17.30±4.4 20.81±4.23 9.09±2.14 -64.46±24.32 ab
6th一天 9.17±8.05 16.17±6.77 12.45±5.9 -81.17±10.08 ab
8th一天 15.20±3.46 19.68±4.62 10.15±0.5 -102.74±22.64
10th一天 19.00±8.27 18.01±1.32 13.4±5.6 -93.85±33.36 ab

表5所示。甲醇提取物的抑制百分比c .竹在不同部位镰刀菌素moniliforme,Phoma sorghina,Aspergilus Flavus和Bypolaris orezae

积极的价值意味着提取物对真菌的抑制效果;负值意味着提取没有抑制作用或提取刺激真菌径向生长。意味着(积极)的抑制百分比值了表6

比例提取物的抑制(%)
真菌 叶子 意大利足协C *
镰刀菌素monififorme 19.41 6.45 6.33 16.16 One hundred.
Phoma sorghina 19.15 One hundred.
Aspergilus Flavus 7.11 10.79 One hundred.
Bypolaris orezae 85.02

表6所示。平均值的比例每个提取物的抑制镰刀菌素moniliforme,Phoma sorghina,Aspergilus Flavus和Bypolaris orezae

结果表明,提取的径向生长抑制f . moniliforme。甲醇花提取物抗真菌活性最高(19.41%),其次是根(16.16%)、叶(6.45%)和茎提取物(6.33%)(表6)。这些值较弱,而那些报道Karanga et al。19]。实际上,这些作者发现f . moniliforme包裹是敏感原油提取、乙酸乙酯和丁醇提取的大肠hirtal . 5毫克/毫升的浓度,记录他们的抑制百分比47.00%;分别为58.33%和57.00%。

不配合,没有提取物表现出抑制作用Bypolaris orezae。事实上这种真菌似乎很难控制的自然提取;甚至足球C,一个强有力的抗菌产品,没有完全控制其径向增长。为Phoma sorghina,只有在其径向生长根提取物有抑制作用。这种抑制作用(19.15%)相比值报告Karanga et al。19)发现,大肠hirta提取5毫克/毫升,显示百分比的抑制真菌从22.00%到44.46%不等。

Aspergilus flavus弱敏感鲜花提取物(7.11%)和根提取物(10.79%),但没有观察叶子和茎提取物抑制作用。面板等。21)还测试了Hyptis spicigera,c .竹c . citratus提取几株Aspergilus。他们发现,在10毫克/毫升的浓度,c .竹精油对曲霉菌株显示出轻微的抑制作用但没有抑制可以观察到Hyptis spicigera精油和有机提取物。据我们所知,有机提取物的抗真菌活性c .竹工厂部分进行了第一次。这种植物的根和花可能含有生物活性化合物与广泛的行动在几个真菌。

Phoma sorghina以及黄曲霉一般不太敏感的几种植物提取物报道在此前的许多作品1,21,22]。当然,植物提取物可能像这类真菌的营养物质;他们丰富培养基和生产菌丝体生长比控制。另一方面,软弱的抑制作用的提取物对真菌可以解释他们的贫穷扩散在培养基。事实上,植物化学的结果表明,甲醇提取物含有许多化学集团可以干预,导致弱扩散。所以进一步分离提取可能减少复杂性和每个分数可能再次被测试的抗真菌活性。进一步的研究可以关注c .竹关于高TPC根和花提取物,交通和抗真菌活性。

结论

获得的结果显示,从这个工作c .竹花、叶、茎和根中一些植物化学物质,特别是酚类和黄酮类化合物。所有不同的植物或多或少富含酚类和部分类黄酮化合物,但花和根被发现展览最高总酚,类黄酮和总抗氧化的内容。此外,methanolic提取花和根既对菌丝生长有抑制作用镰刀菌素moniliforme黄曲霉但也根提取物抑制Phoma sorghina真菌菌丝体生长,一个危险的自然抗真菌通常很难控制的。c .竹根和花提取物可能是一种自然的抗真菌和抗氧化剂来源。还需要进一步的研究来确定化合物的负责感兴趣的活动。

引用

谷歌学者引用报告
引用次数:957

天然产物:一个印度杂志收到957按谷歌学者引用的报告

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