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数量:12 (12)潜力的芽孢杆菌weihenstephanensis PKD5角蛋白酶环保脱毛的皮肤和隐藏
收到:2016年11月25日;接受:2016年12月12日;发表:2016年12月15日
引用:迪帕克·库马尔年代,Suman Kumar H, Hrudayanath T, et al。潜力的芽孢杆菌weihenstephanensis PKD5角蛋白酶的环保皮脱毛和隐藏。Biotechnol印第安纳j . 2016; 12 (12): 119。
文摘
比较脱毛钠分子的效率(1.5%)、曹(1.5%)和原油角蛋白酶(15.3 U /毫升)的芽孢杆菌weihenstephanensis PKD5研究单一和组合在牛皮上,山羊和绵羊皮肤。完成脱毛是通过钠治疗,曹钠,钠与粗角蛋白酶和粗角蛋白酶2后,分别2 2和10 h。在所有的治疗,这种酶治疗皮肤/隐藏相对更白,光滑和闪亮的将公布完整的头发毛囊从皮肤/隐藏。尽管化学(s)和组合化学与酶拔毛皮肤/隐藏在相对较少的时间但酶脱毛提高皮革质量。所以,角蛋白酶生产使用低成本家禽羽毛可用于脱毛,是可持续的和潜在的皮革行业取代化学脱毛。
关键字
芽孢杆菌weihenstephanensis;PKD5;角蛋白酶;皮革;脱毛
介绍
皮革行业一直是传统的工业部门的生产加工皮革。这是一个由肉类产业的产品皮肤和隐藏的动物。据估计,全世界550万吨盐湿生隐藏处理和4.6×105每年吨重的皮革生产(1]。皮革加工涉及到各种操作顺序的方式从原始皮革皮肤/隐藏进程。传统的皮革处理涉及的主要步骤浸泡、脱毛、抑制和晒黑。
脱毛或拔毛是一个重要的和不可避免的一步去除头发皮肤和隐藏。脱毛后,皮革加工等许多治疗除钙,省掉,脱脂、酸洗以级联方式;然后转化为持久,持久的材料适用于各种用途包括鞋子,帽子,夹克,裙子,裤子,腰带,书绑定,皮革壁纸,家具覆盖。一般来说,石灰(曹)和硫化物(Na2S /纳什)同时用于脱毛很长一段时间(2]。石灰作为碱引起肿胀的皮肤/隐藏了天冬酰胺,谷氨酰胺水解胶原蛋白结构,有助于扭曲纤维束去除头发(3,4]。而像钠硫化物2S /纳什被用于脱毛,硫化物离子攻击半胱氨酸残基之间的二硫桥出现在角蛋白结构(5]。皮革的生产和质量没有达到最适条件由于缺乏技术除了石灰和硫化钠的使用。
脱毛的两个主要成分是石灰生产有毒污泥而硫化物是剧毒和令人讨厌的气味。他们在制革厂的废水污染造成污染水源。他们也可能下降处理厂回收的废水的效率6]。暴露在空气中的化学物质在溶液中或坦克在加工厂可以危害工人和症状皮肤刺激、呼吸问题和头晕。在这种关注,酶脱毛的方法,特别是蛋白酶是一个更好的、更环保和可持续的替代,以减少环境污染,有害吗健康对工人的影响以及提高皮革的质量(7- - - - - -10]。
几脱毛的报道证实微生物蛋白酶的就业提供更好的品质皮革在与化学脱毛剂(11- - - - - -16]。中微生物的来源,细菌蛋白酶获得更多的欣赏和关注由于容易通过深层发酵生产,相对更高的产量,减少生产时间和产品容易复苏。然而酶脱毛的商业实现有限由于某些缺点比如酶广泛的pH值和温度稳定性,一致的性能以及生产成本。
目的是寻找一个可行的和环保的替代有害化学物质,本研究旨在评估原油keratinolytic的脱毛效率蛋白酶的芽孢杆菌weihenstephanensisPKD5连同Na2年代和曹(如化学脱毛剂)在单一和组合。
材料和方法
微生物和角蛋白酶的生产
一个强有力的角蛋白酶产生菌芽孢杆菌weihenstephanensis加入PKD5(基因库。JN897383)曾与土样的羽毛堆填区是受雇于本研究[17]。
应变是生长在250毫升厄伦美厄烧瓶在优化条件(g / l):氯化钠5.0,MgSO41.0 K2HPO41.0 (NH4)2所以410.0,2.0,白鸡羽毛,在pH值为8.0,2%培养液(109细胞/毫升),40°C, 120 rpm(7天17]。此后,发酵肉汤是离心机(5590 g×5分钟)和上层清液被认为是粗酶。
酶测定
原油keratinolytic活动酶化验了角蛋白粉(Hi-Media、印度)作为底物的改性方法Gradisar et al。18]。被定义为一个单位的角蛋白酶活动所需的酶量解放1μg酪氨酸在实验条件下每分钟。
脱毛化验
新鲜的完善皮肤山羊;绵羊和牛隐藏从当地屠宰场收集,清洗顺序用氯化钠溶液和水去除杂质在干热灭菌器然后干50°C。皮切成块,孵化了40毫升溶液100毫升烧杯(浸渍法)不同的代理人即1.5%硫化钠(Na2年代),1.5%石灰(曹)和粗酶(15.3 U /毫升)在单一和组合曹(1.5% + 1.5% Na2年代,1.5%石灰Na + 15.3 U /毫升角蛋白酶和1.5%2S + 15.3 U /毫升角蛋白酶)在室温下。皮肤/隐藏蒸馏水处理被认为是消极的控制。定期皮肤/隐藏撤回了脱毛轻轻刮钝手术刀和过程持续10 h。皮肤件和头发分析通过立体显微镜(Magnus MS24)。实验进行了一式三份。一批后,使用酶(组合)的单身女性,也采用新鲜皮肤脱毛效率。
结果
影响不同的代理(s)在皮肤脱毛/隐藏在时间依赖方式调查,无毛绒毛皮的外观和隐藏是所示图1。完整的脱毛治疗后注意到Na2年代(1.5%)、石灰+ Na2年代(1.5%)和Na2S +粗角蛋白酶2 h内孵化/隐藏在所有三种类型的皮肤。原油酶治疗,另一方面完成脱毛实现10 h(内图1)。视觉和stereomicroscopic检查表明,蛋白水解酶去除毛发的毛囊由于皮肤变得光滑,白色和亮。另一方面,化学处理皮硬,暗棕和皱纹(图2)。
图2:立体显微镜照片显示无毛绒(10倍)皮肤山羊(a、d、g)、牛(b, e、h k)和羊(c、f i, l)。a - c: Na2年代,d-f:酶+ Na2年代,胃肠道:石灰+ Na2年代,j-l:酶治疗。
头发收集从传统脱毛通过lime-sulfide过程被发现糊化,随后转化成纸浆(图3显示了Na2S +石灰处理),而头发从酶治疗与卵泡(完整的收集图4)。使用酶后一批也可以无毛绒所有类型的皮肤/隐藏在14 h(有效孵化(图5)有轻微不愉快的气味。
讨论
在我们前面的任务,我们研究了一个强有力的角蛋白酶产生菌b . weihenstephanensisPKD5生产酶利用能力低成本鸡毛[17),将高度可接受在工业大规模生产。这种酶被发现在各种各样的稳定pH值(6 - 9)和温度(30°C到60°C),鼓励在皮革加工中的应用(17]。在目前的研究中,原油的角蛋白酶b . weihenstephanensisPKD5大约需要10 h脱毛(15.3 U /毫升酶浓度、pH值8.0,室温)相对比的报道蛋白酶枯草芽孢杆菌(19),假单胞菌stutzeri应变K4 (20.),芽孢杆菌safensis(21),Paenibacillus woosongensis(TKB2) [22以24小时,20 h, 16 h, 14 h分别(表1)。不过,纯化的酶Brevibacillus短US575大约需要10 h脱毛(23),但净化过程是昂贵的,耗时的和敏感的。因此,粗酶的应用消除了笨重的净化过程。此外,其他原油制备蛋白水解酶的存在可能会增强或他们可能与角蛋白酶协同作用从而加速脱毛效率。
菌株 | 酶(净化/部分纯化/原油)和它的浓度/数量 | 脱毛条件 | 类型的皮肤/隐藏 | 引用 |
---|---|---|---|---|
PaenibacilluswoosongensisTKB2 | 粗酶(3:1 w / v) | 14 h, pH值8 - 9 | 山羊 | [22] |
假单胞菌stutzeri应变K4 | 粗酶(40 U /毫升) | 20 h, pH值8.0,30°C | 山羊 | [20] |
枯草芽孢杆菌 | 粗酶(59 U /毫升) | 24小时,pH值8.0,37°C | 山羊 | [19] |
芽孢杆菌safensis | 粗酶(35.4 U / mlto 50.4 U /毫升) | 16 h, 30°C±2°C | 山羊 | [21] |
Brevibacillus短US575 | 净化(2000 U /毫升) | 10 h, 37°C | 兔子、山羊、绵羊、牛 | [23] |
蜡样芽胞杆菌strainAT | 粗酶(4813 U / g±62 U / g) | 18 h, pH值9.0,30°C | 山羊 | [24] |
铜绿假单胞菌MCM b - 327 | 部分纯化(1%,w / w 20%水) | 16 h, pH值7.0,26°C到30°C | 水牛 | [25] |
Exiguobacteriumsp.DG1 | 粗酶 | 24小时 | 羊 | [26] |
芽孢杆菌circulans | 净化(2 50毫克/毫升) | 16 h, pH值11.0,35°C | 山羊 | [27] |
芽孢杆菌weihenstephanensisPKD5 | 粗酶(15.3 U /毫升) | 10 h, pH值8.0,室温 | 羊、牛、羊 | 本研究 |
表1:比较脱毛条件b weihenstephanensis PKD5报道细菌性角蛋白酶/蛋白酶。
鸡尾酒的化学物质和酶与化学协同加速脱毛过程虽然酶脱毛删除完整的头发而化学脱毛产生hair-pulp。所以,enzyme-based脱毛显著减少污染的机会,消除有毒化学物质的使用以及提高皮革质量。此外,完整的头发(特别是羊)从酶脱毛可以用在纺织工业中恢复过来。
结论
在这项研究中,一个使用keratinolytic环保酶脱毛过程开发蛋白酶的b weihenstephanensis PKD5利用生产低成本鸡毛,哪个更有效的各种类皮肤/隐藏除了减少污染负荷和提高皮革质量。在世界范围内,搜索是一个稳定的酶将更有效的各种类型的隐藏和皮肤上。酶在这个问题,大规模生产和后续申请脱毛可以应付正常的皮革在工业生产的规模水平。
引用
- 保罗•T Jana Mandal AK, et al .细菌keratinolytic蛋白酶,即将启动下创皮革和洗涤剂行业。可持续的。化学制药。2016;3:8-22。
- Saravanabhavan年代,Thanikaivelan P,小饶,et al .硅酸盐增强酶脱毛:一个新的牛皮lime-sulfide-free过程。环境科学工艺。2005;39:3776 - 83。
- Sivasubramanian年代,MuraliManohar B,拉贾拉姆,et al。环保石灰和硫化物自由酶脱毛的皮和皮革使用细菌碱性蛋白酶。臭氧层。2008;70:1015-24。
- Heidemann大肠新胶原结缔组织的化学和结构的发展及其对皮革生产的影响。J Soc Leath科技Ch。1982; 66:21-9。
- 乔杜里RB, Jana AK, Jha可酶技术在皮革加工中的应用。印第安纳州J化学抛光工艺。2004;11:659 - 71。
- 戴维斯RM。设置制革行业废水的许可限制。J Soc Lea抛光工艺化学1997;8:32-6。
- 智库K, Morimura年代,野田佳彦J, et al .酶法水解的角和蹄牛和水牛。J Bios Bioeng。1995; 80:478 - 84。
- 马赛AJ, wobd DS,河R, et al。小说角蛋白酶从枯草芽孢杆菌S14系列表现出显著的脱毛的能力。:环境Microbiol。2005; 71:594-6。
- Priya年代,拉贾拉姆,拉贾拉姆R, et al .纯酶脱毛的皮肤。J Soc Leath科技Ch。2008; 92:214-21。
- 时,朋友HS,辛格R, et al .碱性的潜力蛋白酶隔绝高温放线菌属sp。RM4代替传统的化学物质在皮革行业脱毛的过程。Int J阿格利司环境生物技术。2011;4:173-8。
- 叶M, Srividya s偏碱性洗衣粉的净化和属性兼容蛋白酶新孤立的芽孢杆菌物种y J Microbiol。2010; 50:309-17。
- Chauhan PS乔治·N Sondhi年代,et al。微生物mannanase乐动体育在线s净化策略的概述。Int J制药生物科学。2014;5:176 - 92。
- 曼丁哥人党卫军,古普塔N, Ghosh, et al .同源性模型一个新颖的木聚糖酶:分子热稳定性和碱性稳定的基础。J BiomolStrDyn。2000;18:137-44。
- Chauhan PS,宫殿N, Sharma P, et al。Mannanases:微生物来源,生产、性质和潜在的生物技术的应用。生物科技:Microbiol》。2012; 93:1817-30。
- Kandasamy N, P Velmurugan, Sundarvel et al . Eco-benign酶脱毛的山利用蛋白酶从荧光假物种从鱼内脏分离浪费。J清洁刺激。2012;25:27-33。
- Kumar VE Srijana M, Kumar K,等。一种新型丝氨酸碱性蛋白酶从芽孢杆菌altitudinis GVC11脱毛剂及其应用。生物处理Biosyst Eng。2011; 34:403-9。
- Sahoo DK, Das, Thatoi H, et al .角蛋白酶生产和生物降解的整个鸡羽毛角蛋白的新孤立的细菌在深层发酵。生物科技:生物化学》。2012;167:1040-51。
- Gradisar H, Kern年代,弗里德里希·j·角蛋白酶Doratomycesmicrosporus。生物科技:Microbiol》。2000; 53:196 - 200。
- Kazi YF, Kumar P·索默洛IH。表征keratinolytic活动的土著枯草芽孢杆菌角蛋白酶。J化学制药研究》2015;7:800-9。
- 查图尔维迪V, Bhange K, Bhat R, et al。生产kertinases使用鸡毛作为衬底的新型多功能菌株假单胞菌stutzeri及其脱毛应用程序。生物科技Biocatal阿格利司》。2014;3:167 - 74。
- Lateefa A Adelerea IA Gueguim-Kanac EB。芽孢杆菌safensis刘13:一个新的角蛋白酶的来源,并阐述其多功能biocatalytic应用程序。生物科技Biotechnol》装备。2015;29:54 - 63。
- 保罗•T Das, Mandal,等。有效的脱毛角蛋白酶的性质PaenibacilluswoosongensisTKB2在固态发酵获得的。浪费生物质英勇。2014;5:97 - 107。
- Jaouadi新西兰Rekik H,巴迪,et al .生化和分子特性的丝氨酸角蛋白酶Brevibacillus短US575承诺keratin-biodegradation和hide-dehairing活动。《公共科学图书馆•综合》。2013;8:1-17。
- Vijayaraghavan P,拉撒路,文森特下界估计。De-hairing蛋白酶生产一个孤立的蜡样芽胞杆菌应变在固态下发酵使用牛粪:生物合成和属性。沙特J Sci杂志。2014;21:27-34。
- Zambare VP Nilegaonka年代,Kaneka p .小说细胞外蛋白酶从绿脓杆菌MCM b - 327:酶生产及其部分描述。生物科技新》。2011;28:173 - 81。
- Yusiati LM Gumilar J, Triatmojo年代,et al .隔离,标识和脱毛印尼本地keratinolytic细菌的活性ExiguobacteriumDG1 sp。生物科技Pak J》。2015;12:41-8。
- 苏巴拉奥CH, Sathish T, Ravichandra P, et al .特性和热力洗涤剂稳定的丝氨酸蛋白酶从孤立的芽孢杆菌circulans和评价生态友好的应用程序。学生物化学过程。2009;44:262-8。