审查
,数量:4 (3)离子色谱法是什么?其原理和应用
收到:2021年12月01日;接受:2021年12月15日;发表:2021年12月22日
引用:辛格k .离子色谱法是什么?其原理和应用。生物化学杂志。4 (3):149
文摘
介绍
粒子色谱法(或粒子贸易色谱)隔离粒子和极性原子粒子交换器依赖于他们的偏爱。它处理几乎任何类型的带电particle-including巨大的蛋白质,小核苷酸和氨基酸。尽管如此,粒子色谱法应该做一个单位的条件从蛋白质的等电点。
这两种粒子色谱法anion-trade cation-trade。Cation-trade色谱法是利用当兴趣明显带电的粒子。粒子明显指控的事实是色谱的pH值是不完全是π(k / pH值(我))。在这种色谱中,固定阶段是不利指控和着重带电原子堆积所吸引。Anion-trade色谱法一点上,固定阶段明显,反之带电原子(暗示pH值色谱法比π)堆积更值得注意的是。它经常用于蛋白质过滤、水分析和质量控制。
water-solvent和带电粒子像蛋白质,氨基酸,和肽系由框架离子电荷相反半个证券的不溶性固定相。得功利主义的平衡固定阶段包括收集指定原子的结合被孤立和测量可以通过分割一个领带在阳离子固定阶段是用来隔离离子和阴离子固定阶段是用来隔离阳离子。阳离子贸易色谱法利用当理想的粒子分离阳离子和阴离子贸易吗色谱法利用分离阴离子。束缚原子,在这一点上,可以筛选了,收集利用的洗提液含有阴离子和阳离子通过运行更高的粒子收敛段或改变的pH值段。
的一个重要好处利用粒子色谱法只是一个协会需要在分区,而不是其他的划分方法;沿着这些线路,粒子色谱法可能会有更高的电阻网络。粒子贸易的一个好处是洗脱的一致性设计(根据得集团)的存在。例如,当阳离子贸易色谱法是利用阳离子会洗提。与此同时,负带电粒子会洗提。在任何情况下,都有同样的损害包括粒子在执行贸易色谱法,例如,持续发展的策略提示的不规则部分列。一个重要约束,这种清洗方法是限制得组。
仪表
粒子贸易色谱法孤立原子依赖于他们的特定的聚会。粒子贸易色谱持有部分依赖于铌的分析物原子(离子)通信。粒子贸易色谱晶格包括重点和不利带电离子。从本质上讲,原子通过静电网格与逆指控在固定的合作阶段。固定阶段组成一个稳定的网格包含带电得实用的聚会或配体。固定阶段表面离子功利主义集会演讲(r×)与分析物的颗粒逆。完成电中立,这些潜在的指责几个可互换的反离子的安排。得粒子被净化处理这些可替换的反离子对固定费用限制在固定的舞台上。
这些得粒子或举行筛选了依赖于它们的电荷。起初,原子不领带或领带可怜固定阶段首先被冲走。修改粒子的洗脱条件需要紧点固定的阶段。可更换的集中化反离子,为限制竞争对手的原子,可以扩展或pH值可以改变。调整pH值的影响特定粒子的电荷,因此,改变限制。原子,在这一点上,开始淋洗依赖的发展费用的变化。进一步可以利用这些变化提供感兴趣的蛋白质。此外,分组的抗衡离子可以不断波动孤立电离粒子。这种洗脱叫做倾向洗脱。再一次,一步洗脱可以利用的集中反离子不同在一个步骤。
应用程序
临床实用程序
利用粒子色谱法可以在镀银层析。通常,银和混合物含有炔属和ethylenic债券异常脆弱的通信。通常这个特点已经试穿了烯烃化合物。粒子建筑使烯烃与银粒子是无能为力,依赖于覆盖的π,σ,d轨道和访问电子沿着这些思路导致双重的债券没有真正的改变。这种行为控制分离脂质,主要是不饱和脂肪的组合与不同数量的双重的部分证券利用银粒子。粒子海员被浸渍银粒子,然后提交给不同的酸(含硅的腐蚀)洗提各种属性的不饱和脂肪。
位置的限制真的低获得金属离子的盐。可能是用于估计糖化血红蛋白、卟啉和细化。粒子交换树脂(IER)通常使用特别是在处方由于其高限制和简单的分区周期的安排。生产使用的是利用离子交换树脂对肾透析。这种技术利用血液隔离组件利用纤维素膜假肾。
一个临床利用粒子色谱法在快速阴离子贸易吗色谱法策略用于隔离从人类血清肌酸激酶同功酶(CK)和组织获得的事后材料(大部分CK丰富组织利用,例如,心脏肌肉和大脑)。这些iso酶结合MM, MB, BB,所有做一个类似的能力独特的氨基酸腐蚀性继任的问题。这些iso的元素在肌酸酶是改变,利用ATP,磷酸肌酸驱逐ADP。比平时小部分被加载了DEAE-Sephadex 50和进一步筛选了tris-cradle氯化钠在不同固定(每一个重点是选择盈利控制洗脱)。人体组织解救被嵌入部分分区(1]。
工业应用
进展的主观框架单元测试或更少的紫外线测试。粒子,动力、电镀和油门踏板可以测量。离子贸易色谱法一点一点地已经成为广泛,广泛的战略位置的阴离子和阳离子的种类。应用程序创建了这样的目的,或者是正在进行的工作,对各种领域的兴趣,特别是,毒品生意。使用粒子贸易色谱法在药物最近已扩大,2006年,部分粒子贸易吗色谱法正式加入美国Pharmacopia——国家规定(USP-NF) [2]。
药物开发
有兴趣发展利用IC的调查药物药物。集成电路是利用不同地区的项目发展和质量控制测试。例如,集成电路是利用进一步发展可靠的品质和药物的溶解度性质动态药物粒子就像用来识别框架承担自然溶剂有更高的能力。集成电路已用于分析物的保证的蜕变测试。例如,钙蜕变测试表明,不同的颗粒介质中可以很大程度上解决了自己而且从钙粒子。沿着这些线路,IC一直在使用药物平板电脑和容器决定药物分解与时间的测量。IC是另外广泛用于识别和评估药物辅料或惰性设备利用的计划。发现糖和糖液在这样的细节通过集成电路已经完成,因为这些极地聚会得到定居在粒子段。集成电路的方法另外定居在检查药物物质和物品的污染。污染或任何部分不是片药物物质元素的评估,他们给的知识最大的和最小的措施应该控制的药物在病人每一天3]。
引用
- 杰克逊PE、波尔CA。抑制离子色谱固定相的进步发展。TrAC。1997;16:393 - 400。
- 露西CA。在离子色谱法最新进展:一个视角。J Chromatogr。1996;739:3-13。
- Roig-Navarro房颤,Martinez-Bravo Y,洛佩兹FJ,等。同时测定砷物种由高效液相和铬(VI) chromatography-inductively耦合等离子体质谱法。J Chromatogr a . 2001;912:319 - 327。
